贵州星博元生物医学科技有限公司本次登记的数据知识产权植物外泌体规模化制备数据集,一、植物前处理过程:1.将植物洗净晾干,并将其杆部切成2cm左右长度的小段,使用粉碎机将其粉碎为粉末备用,对粉碎后的粉末进行称重,配置浸取液。2.粉末浸泡:将粉碎好植物倒入500mL烧杯,之后加入475mL配制好的磷酸盐溶液,搅拌均匀后加入25mL配制好的裂解液。混匀后室温放置1h后置于4℃冰箱浸泡24h。3.1000g,4℃离心10min,取上清;3000g,4℃离心30min,取上清;13000g,4℃离心90min,取上清。4.将上清液收集后,安装真空抽滤器,抽滤器的滤膜先后使用0.8um、0.4um、0.2um滤膜过滤上清液,收集过滤后的滤液备用。 二、外泌体提取:1.按照说明书将中空纤维柱与管路连接,确保连接正确与紧密。之后将纯水倒入物料罐内,并且连接好物料罐管路。将物料管上的循环管拔出并放置到滤出烧杯上。2.在控制平板上打开切向流操作软件,选择润洗模式。设置实验名称后进行终点选择。以时间为终点即表示润洗时长,设置为5min,主泵流速设置为30ml/min,搅拌转速设置为0。设置好后点击开始实验,利用纯水将纤维柱内的氢氧化钠冲出,使用pH试纸检查管内酸碱度,直至管内液体为中性
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